Stymulujące autoprzeciwciała wobec receptora PDGF w twardzinie układowej ad 8

Długotrwałe utrzymywanie się reaktywnych form tlenu i ERK1 / 2 ostatecznie prowadzi do stymulacji ekspresji genu kolagenu. Aby określić efekty biologiczne wywołane przez twardzinę skóry twardzinowej, zbadaliśmy ekspresję dwóch genów, które charakteryzują fibroblasty twardziny – geny kodujące .-prolinę mięśni gładkich i kolagen typu I – w normalnych ludzkich fibroblastach eksponowanych na twardzinę skóry twardzinowej. A-aktyna mięśni gładkich jest charakterystycznym markerem miofibroblastów, które są komórkami mezenchymalnymi, które pochodzą z fibroblastów i które mają właściwości zarówno komórek mięśni gładkich, jak i fibroblastów. Substancja .-aktyny mięśni gładkich była indukowana przez twardzinę skóry IgG w prawidłowych ludzkich fibroblastach, ale nie przez normalne IgG (P <0,001), zgodnie z testami immunohistochemicznymi i immunoblottingiem (Figura 4A). Kwas rybonukleinowy Messenga kodujący łańcuchy kolagenu .1 i .2 typu I był silnie indukowany przez sklerodermalną IgG, a nie przez normalne IgG, co pokazano za pomocą analizy Northern blot i ilościowej analizy reakcji łańcuchowej polimerazy w czasie rzeczywistym (Figura 4B). Ponadto, inhibitor kinazy tyrozynowej PDGFR AG 1296 hamował ekspresję genu kolagenu typu I w dół. Aby zademonstrować, że pojedyncze przeciwciało było zdolne do indukowania ekspresji genów kodujących kolagen i .-aktynę mięśni gładkich, testowaliśmy oczyszczone przeciwciała klonalne. Te przeciwciała indukowały ekspresję tych genów o wyższej aktywności właściwej niż całkowita twardzina skóry (1 do 2 .g białka na mililitr w porównaniu do 200 .g na mililitr) (Fig. 1A i 1B z Dodatku Aneks). Ponadto przeciwciała te były długotrwałymi stymulatorami, ponieważ ich indukcja ROS trwała dłużej niż indukcja ROS przez PDGF (ryc. 2 Dodatku Aneks). Ogólny schemat przedstawiający możliwy mechanizm wyzwalany przez autoprzeciwciała na PDGFR pokazano na rysunku 5.
Dyskusja
Pięć niezależnych eksperymentów w obecnym badaniu dokumentuje obecność przeciwciał stymulujących PDGFR w surowicy pacjentów ze sklerodermią. Po pierwsze, oczyszczone frakcje immunoglobulin od pacjentów z twardziną indukowały poziomy ROS w komórkach eksprymujących PDGFR, ale nie w komórkach, z których nie było PDGFR. Po drugie, frakcje immunoglobulin od pacjentów z twardziną rozpoznawały i immunoprecypitowano PDGFR (łańcuchy . i .) w jego natywnej konfiguracji. Po trzecie, wiązanie PDGFR i aktywności wytwarzające ROS sklerodermalnych IgG usunięto przez wstępną adsorpcję do rekombinowanych PDGFR lub komórek eksprymujących PDGFR, a nie do komórek bez PDGF. Podobnie, PDGF konkurencyjnie hamował wiązanie oczyszczonych przeciwciał z komórkami wyrażającymi PDGFR. Po czwarte, frakcje immunoglobulin lub oczyszczone przeciwciała pochodzące od pacjentów z twardziną indukowaną konwersją miofibroblastów, ekspresją kolagenu typu I i wytwarzaniem ROS w normalnych fibroblastach. Ostatecznie wykryliśmy te przeciwciała u wszystkich 46 badanych pacjentów ze sklerodermą iu żadnej z kontroli. Aktywność indukujących ROS immunoglobulin sklerodermalnych była hamowana przez inhibitory PDGFR. Przeciwciała te nie zostały wykryte u pacjentów z pierwotnym objawem Raynauda, układowym toczniem rumieniowatym, reumatoidalnym zapaleniem stawów lub śródmiąższową chorobą płuc.
[patrz też: siłownie plenerowe, apteka internetowa rzeszów, dyżury aptek olecko ]
[hasła pokrewne: piramida zdrowia dla dzieci, urolog od czego, duostea ]